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中國水科院黃海水產研究所科研系統介紹之海水養殖生物疾病控制與分子病理學

中國水科院黃海水產研究所科研系統介紹之海水養殖生物疾病控制與分子病理學

  海水養殖生物疾病控制與分子病理學實驗室

  海水養殖生物疾病控制與分子病理學是海洋漁業資源可持續利用重點開放實驗室的重點學科之一。本研究室針對我國海水養殖主要病害問題,承擔國家和部門的重大科研專案,開展基礎研究、應用基礎研究和相應的技術研發,進行海水增養殖疾病防治的知識和技術創新及人才培養,為我國海水增養殖業的穩定持續發展提供理論基礎和技術支援。海水養殖生物疾病預警理論與技術,海水養殖生物的疾病發生與流行機理,海水養殖動物免疫與抗病機理,養殖環境健康管理與生物修復機理等研究是本室的重點研究發展方向。

  科研專案最新進展

  我所海水養殖生物病害控制與分子病理學實驗室是我國最早開展海洋病毒研究的實驗室之一。在國內外率先發現並報道了3種重要養殖生物的病毒性病原,即對蝦白斑病病原WSSV、扇貝大規模死亡病原AVNV和大菱鮃紅體病病原TRBIV。近5年來,該實驗室主持承擔了國家973課題2項、863課題2項、948專案1項、公益性行業專項1項、國家自然科學基金課題3項、山東省課題2項、國家及行業標準專案4項;發表論文120餘篇,其中SCI期刊收錄12篇,申報專利9項,獲授權專利4項,出版行業標準24項。目前實驗室有固定研究人員有13名,博士後工作人員2名,其中研究員5名,副研究員5名;博士生導師1名,碩士生導師5名;54%人員有博士學位;已培養博士生8名,碩士生70名;在讀博士生4名,碩士生27名。

  對蝦白斑綜合症病毒(WSSV)的研究進展

  完成了WSSV多個基因組突變位點的序列測定和分子流行病學分析,透過Western Blot實驗、質譜技術等方法,發現了WSSV粘附蛋白和相對應的對蝦細胞受體蛋白;獲得TOP10-pBADgIIIA-vap1、TOP10-pBADgIIIA-vp154 和TOP10+pBADgIIIB+RP12.7多個對蝦重組表達載體;最佳化重組粘附蛋白VAP1(rVAP1)的發酵條件,從收穫時間、發酵體積、培養基的pH值、以及培養基成分的適當配比方面採用均勻設計方法作了系統性的研究,實現rVAP1的高密度表達;構建VP28 DNA類疫苗,研究其對凡納濱對蝦免疫作用,結果表明,免疫7天組注射病毒後對蝦存活率高於免疫14天組.PCR、RT-PCR以及Western-blotting分析表明,免疫14天后,在對蝦鰓、肌肉以及頭部組織中均可檢測到VP28的表達,表明DNA疫苗可持續表達較長時間。

  大菱鮃紅體病虹彩病毒(TRBIV)的研究進展

  TRBIV是我國工廠化養殖大菱鮃的主要病毒性病原之一,隸屬於虹彩病毒科腫大細胞病毒屬,為雙鏈DNA病毒。TRBIV的基因組全序列為110104 bp,G+C含量55%,含115個ORFs。建立了TRBIV套式PCR、Real-time PCR和LAMP檢測方法,檢測發現病魚的多個組織中均存在病毒感染,其中脾和腎是最主要的靶器官,每毫克組織病毒含量分別高達5.23×106個和2.18×106個。調查發現TRBIV在中國和韓國廣泛存在,在黑鮶、半滑舌鰨等魚類中存在無症狀感染。但自2003年以來山東半島不同養殖地域、不同採集年代的TRBIV基因序列完全相同,沒有發生變異。

  扇貝急性病毒性壞死病毒(AVNV)的研究進展:

  應用PCR技術和分子克隆等技術,首次對AVNV的基因組全序列進行了克隆與測定,其基因組全長為210,993 bp(GeneBank 號:GQ153938)。AVNV 基因組的兩個末端存在較大的反向重複序列,該特徵符合皰疹病毒基因組的基本特徵,推測AVNV可能是皰疹病毒目中Malacoherpesviridae 下不同於oshv-1的一個新種。建立了AVNV分子診斷技術體系,包括PCR 檢測技術、巢式PCR 檢測技術、環介導等溫擴增(LAMP)檢測技術和熒光實時定量PCR 檢測技術。AVNV診斷技術體系的建立為該疾病的快速診斷、致病機理的探討、分子流行病學調查和傳播途徑的調查以及預警監測體系的建立提供了重要的技術保障。採集於青島流清河海區養殖櫛孔扇貝樣品進行檢測,結果顯示,在夏季大規模死亡前後兩個月(5、6、10、11)AVNV的陽性檢出率較低,達10%-20%。在夏季大規模死亡時AVNV陽性檢出率較高,8月和9月發生扇貝大規模死亡的兩個月可達70%。採集于山東長島的櫛孔扇貝、蝦夷扇貝、紫貽貝、長牡蠣,大連的蝦夷扇貝,福建的雜色蛤和廣西的.近江牡蠣等養殖貝類中都檢測到AVNV的存在,提示AVNV在養殖貝類中有較廣泛的宿主範圍。

  重點任務

  針對我國海水養殖產業可持續發展的重大科學問題和產業發展需求,探索海水養殖動物健康和病害控制的新理論、新途徑、新技術和新模式。重點圍繞海水養殖動物的分子流行病學、病原和宿主相互作用機理、動物免疫機理及免疫防治途徑、病害控制的生態機理和技術途徑等四個方面,構建新的理論和技術體系,系統提升海水養殖動物健康和病害控制的理論與技術水平。形成一批居國際前沿水平的創新性研究成果,建立病害控制的產業化示範基地,促進我國海水養殖業的健康、高效和可持續發展,引領並推動產業向新的技術高度跨越;建立以中青年為主體、頗具創新能力的研究團隊,造就一批在國內外有影響力的中青年學術帶頭人。

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