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顯微鏡實驗方法和技術知識點整理

顯微鏡實驗方法和技術知識點整理

  一、實驗方法

  1.顯微觀察法:如“觀察細胞有絲分裂”、“觀察葉綠體和細胞質流動”、“用顯微鏡觀察多種多樣的細胞”等。

  2.觀色法:如“生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質的鑑定”、“觀察動物毛色和植物花色的遺傳”、“DNA和RNA的分佈”等。

  3.同位素標記法(元素示蹤法):如“噬菌體浸染細菌的實驗”、“恩格爾曼實驗”等。

  4.補充法:如用飼餵法研究甲狀腺激素,用注射法研究動物胰島素和生長激素,用移植法研究性激素等。

  二、實驗技術

  1.光學顯微鏡的使用:包括顯微鏡的取送、放置、旋轉、對光(反光鏡及光圈的使用)、低倍觀察、高倍觀察、鏡頭的擦拭;顯微鏡的放大倍數(是物體的長和寬,不是面積,也不是體積)、焦距問題、物鏡離裝片的遠近、準焦螺旋的使用、顯微鏡使用時物象移動方向、顯微鏡使用時異物的判斷(通常透過移動玻片、轉動轉換器或旋轉目鏡來判斷)。

  2.臨時裝片、切片和塗片的製作:適用於顯微鏡觀察,凡需在顯微鏡下觀察的生物材料,必須先製成臨時裝片、切片和塗片,如“觀察植物細胞的質壁分離和復原”中要製作洋蔥表皮細胞的.臨時裝片,在“生物組織中脂肪的鑑定”中要製作花生種子的切片,在“觀察動物如人體血液中的細胞”中要製作血液的塗片等等。

  3.研磨,過濾:適用於從生物組織中提取物質如酶、色素等,要求學生熟練掌握研磨、過濾的方法,如研磨時要先將生物材料切碎,然後加入摩擦劑(常用二氧化矽)、提取液和其它必要物質,充分研磨之後,往往要進行過濾,以除去渣滓,所用過濾器具則根據需要或根據試題中提供的器材加以選用,如可用濾紙、紗布、脫脂棉、尼龍布等。

  4.解離技術:適用於破壞細胞壁,分散植物細胞,製作臨時裝片。

  5.恆溫技術:適用於有酶參加的生化反應,一般用水浴或恆溫箱,根據題目要求選用。

  6.層析技術:適用於溶液中物質的分離。主要步驟包括製備濾紙條、劃濾液細線、層析分離等。

  7.植物葉片中澱粉的鑑定:適用於光合作用的有關實驗,主要步驟包括飢餓處理、光照、酒精脫色、加碘等。

  8.根尖培養技術:有絲分裂實驗的材料

  9.小動物飼養技術:飼養小白鼠等實驗動物

  10.無土栽培技術:用於植物必需元素與非必需元素的鑑定

  11.微電流測量技術:用於刺激神經元細胞時,興奮的傳遞情況。刺激神經元的某一點時,相對於該神經元的刺激點而言,其兩側均有電位變化(用兩表則可在兩側任意位置,用一表測定則相對於受刺激點不等距位置有兩次偏轉)可證明在同一神經元內具有雙向傳遞性;刺激突觸前神經元時,突觸後神經元可測得電位變化,刺激突觸後神經元時,突觸前神經元測不到電位變化,可證明突觸傳遞具有單向傳遞性。

  12.pH控制技術:利用緩衝液調節pH,確保實驗環境的pH相對穩定。

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