學生化學專業實習報告
生產實習是學校為鍛鍊本科生能力，讓我們能更好的與社會相適應而組織的大三本科生的生產實踐活動。接到要去生產實習的通知後，我很高興，並積極聯絡，終於將實習地點定在大慶油田水處理與化學研究所。這是因為：首先，水化室的主要工作是油田水處理，化學劑量開發及檢驗，和我們的專業有一定的關係;其次，我們的課程當中並未涉及到有關水生細菌的詳細知識，在這裡進行生產實習可以擴充套件這方面的知識;我們在實驗中所學習的操作方法可以得到應用基於以上幾方面的原因，我選擇在水處理所開始我的生產實習。
水處理與化學研究所隸屬於大慶油田工程設計開發有限公司，原名大慶油田建設設計水處理及油田化學研究室(水化室)位於黑龍江省大慶市讓胡路區油田設計院。多年來研製出原油破乳劑、油田清防蠟劑、油田防蠟劑、原油降粘劑、原油消泡劑、汙水絮凝劑、防垢劑、緩蝕劑等12個系列40餘種油田化學劑。
該所現有高中級職稱的專業人才32人，博士2人，碩士8人。XX年通過了國家級計量認證。同年與哈爾濱工業大學強強聯合，成立了哈爾濱工業大學環境科學與工程大慶研發中心。擁有研究儀器裝置100多臺(套)，其中進口裝置佔60%實驗室總面積為3000平方米。微生物實驗室，可進行菌種培養馴化分離。擁有國內規模裝備最為先進的三次採油實驗室，可進行各種除油及過濾工藝和裝置試驗可自動合成的高壓聚合反應實驗室。
由於我的實習時間只有三個星期，故在劉老師的安排下對SRB做些認知性的實習，以下為我的主要實習內容
大致瞭解實驗室自XX年開始啟動的SRB抑制課題的一些工藝原理流程
硫酸鹽還原菌(SRB)是導致大慶油田地面系統產生硫化物從而造成裝置腐蝕、濾料汙染等危害的根源;實驗室立足於微生物生態抑制，改變以往追求殺滅SRB數量的目的，轉而以抑制SRB活性為目的,是大慶油田系統控制SRB危害的新方法，可降低生產執行成本
本研究採用的折流板反應器有7個單元格，每個單元格長*寬*高=9.5cm*12cm*42cm,有效體積4.4L,單元格內裝1/3高度的活性汙泥.反應器上部為排氣孔，排氣孔的'導氣管伸到水封瓶液麵以下，保持整個系統厭氧狀態.
水箱中的水透過泵泵入反應器，以推流形式流過各單元格，並從反應器流出。
反應器的啟動與執行
將含有大量的硫酸鹽還原菌的厭氧汙泥，接種到反應器中;
現階段，反應器進水為配製的模擬水，在自來水中加入碳源(白糖)、硫酸鈉、少量複合肥，用碳酸氫鈉調節鹼度;濃度：COD=1800mg/L,SO42-=600mg/L左右;進水流量46L/d, 每個單元格水力停留時間(HRT)=2.3hr
一、微生物鏡下觀察
G氏染色
步驟為：塗片→固定→結晶紫色染色→水洗→碘液媒染→水洗→酒精脫色→番紅復染→水洗→乾燥→觀察。
塗片 與單染色法相同。
固定 與單染色法相同。
結晶紫染色 染色1分鐘，然後水洗並用吸水紙吸乾。
碘液媒染 染色1分鐘，然後水洗並吸乾。
酒精脫色 用95%酒精脫色，直到酒精不出現紫色時即停止(大約半分鐘)，然後立即水洗，並吸乾。
番紅復染 染色3分鐘左右，然後水洗並吸乾。
鏡檢 在顯微鏡油鏡頭下觀察，菌體顯藍紫色的為革蘭氏陽性菌;菌體顯紅色的為革蘭氏陰性菌。
SRB為革蘭氏陰性菌(具體操作中由於番紅變質幾次實驗結果均不理想)
二、厭氧型為生物的培養(SRB和DNB的富集)
1.SRB菌
採用
Hungate厭氧操作技術、絕跡稀釋法(MPN)以及“滾管”培養對樣本進行分離，多次純化獲得純菌株SRB。
具體方法：向改良後Starkey培養基(K2HPO4 0.5g，NH4CI 1.0g ，Na2SO4 10g ，CaCI22H2O 0.1g ，MgSO47H2O 2.0g，酵母膏 6.0g ，60%的乳酸鈉溶液 6ml，蒸餾水1000 ml，pH=7.8)中加入0.2%的刃天青溶液，培養基煮沸後，加入L-半光鹽酸鹽0.5g，通入高純氮氣驅氧30min，121℃滅菌20min，固體培養基加入16%的瓊脂糖。
單獨配 3%的FeSO4(NH4)2 SO4 厭氧
SRB菌株於液體培養基中37℃培養48h 後, 在Olympus COVER-018光學顯微鏡下革蘭氏染色觀察。
2.DNB菌
方法同SRB菌，PH值最好在7，
藥品：
(NH4 ) 2SO4 3 g, KCl 0.1 g, K2HPO4 0.5 g, M gSO47H2O 0.5g,
Ca (NO3 )2 0.01 g, FeSO47H2O 8.0 g, 蒸餾水1 000 mL
121℃滅菌15 m in。
恆溫搖床培養箱振盪培養
由於此項操作開始時間較晚，至實習結束，菌落還未完成一個完整週期的培養。
三、水生細菌的計數
1.血球板計數法
取樣：先清洗一個容量為100毫升的取樣瓶或燒杯。取樣前輕輕振盪試管攪拌，待分佈均勻後，立即用注射器針管(無菌)取樣，取樣的量為1毫升。加蒸餾水100倍稀釋。
樣品放於計數板：放置前必須將血球計數板和蓋玻片清洗乾淨、擦乾，不能有油汙染和雜質。將血球計數板平放在桌子上，蓋好蓋玻片;然後把樣品瓶輕輕搖動幾下，菌分佈均勻，並立即用乾淨的微吸管取樣品，迅速把微細吸管放到蓋玻片的邊緣處，輕壓微細吸管的橡皮帽，使樣品流入計數板內。注意控制樣品流入量，不能過多，過多則流入到溝內;也不能過少，過少則計數時不準確(計數後的數量一般偏少)，應充滿畫線方格及其周邊部分。還應注意蓋玻片下不能有氣泡存在，否則會造成計數不準確。樣品吸入血球計數板後，稍停1分鐘，待細菌沉降在玻片表面上再在顯微鏡下進行計數。
計數：計數中央大格的4個角的中格，每個中格有25個小格，逐一計數，4箇中格相加共計數100個小格。計數時應從計數框一角開始，在計數框邊緣的標本應按"計上不計下、計左不計右"的原則，計數出細菌的總量後，按下式計算出每毫升菌液中的細菌數量：細菌數量=100個小格的細菌數×4×10000×稀釋倍數。
注意每個樣品最少重複計數兩次，然後取其平均值
#2 895=179(47,35,30,39,28)*5 1595=319(12,30,153,57,67)*5
(895+1595)/2*10000*100=1245*1000000
#8 815=163(50,50,20,32,11)*5 305=61(16,11,12,12,11)*5
(815+305)/2*10000*100=560*1000000
2.MPN法計數
1)稱取樣品1g，放入90ml無菌水中，振盪，讓菌充分分散，然後按十倍稀釋法將其製成10-1稀釋液。
2)將26支裝有培養液的試管(帶膠塞，厭氧)按縱3橫8的方陣排列於試管架上，第一縱列的3支試管上標以10-2，第二縱列的3支試管上標以10-3……第八縱列的3支管上際以10-9(即採用8個稀釋度，3個重複)，另外2支試管留作對照。
3) 用無菌注射器針管按無菌操作要求吸取10-1的土壤稀釋液各lml放入編號10-2的3支試管中，再從10-2稀
釋液各lml放入編號10-3的3支試管中，依次向後稀釋。對照管不加稀釋液。
4)將所有試管置28℃培養8天后觀察結果。
對照相關的MPN計數表查尋
MPN計數結果
2.0*100000 cfu/ml
一點建議：
在用電極法測定出水各項指標的時候，曾出現硝酸根一直無法檢測或是與預期濃度相差很多的情況(進水裡含有硝酸根)，懷疑在進如反應器前某些微生物分解白糖時將硝酸鈉作為氮源利用(所學有限)，受師兄的啟發提出新增加一個泵將硝酸鈉和其它進水成分分開泵入，之後的測驗效果還不錯
三個星期的實習生活讓我能把學到的知識得以應用，並且學到了一些在校園內無法深刻領悟的東西……一些感悟……
1.你可以偽裝你的面孔你的心，但絕不可以忽略真誠的力量。
第一天去單位實習，我懷著惴惴不安的心情，之前聽過很多關於實習生的傳聞，說他們在單位要麼被當成透明人，要麼就淨幹些雜活，於是有點擔心自己會和他們一樣。
踏進實驗室，只見幾個陌生的臉孔。我微笑著和他們打招呼。從那天起，我養成了一個習慣，每天早上見到他們都要微笑的說聲"早晨"或"早上好"，那是我心底真誠的問候。我總覺得，經常有一些細微的東西容易被我們忽略，比如輕輕的一聲問候，但它卻表達了對同事對朋友的關懷，也讓他人感覺到被重視與被關心。
僅僅幾天的時間，我就和同事們打成一片，我擔心變成"透明人"的事情根本沒有發生。
他們把我當朋友，也願意把工作分配給我。
我想，應該是我的真誠，換取了同事的信任。
2.當你可以選擇的時候，把主動權握在自己手中。
我想很多人和我一樣，剛進實驗室的時候，都做過類似刷片子洗瓶子搬蒸餾水的"雜活"。
或許同事們認為你是小字輩，要從小事做起，但有些時候，是因為他們心中沒底，不知道你能做什麼。
當你只有技術沒有idea時，只能被派去做一些雜活;而當你有自己的idea能獨當一面時，就會被委以挑戰性的重任。因為，技術人人都可以學，而對於自己的idea你則擁有"專利權"因此，不要害怕將來從事的工作需要掌握新的技術，其實，技術不難學到手，難的是在工作中時時讓自己的腦袋運轉，激盪自己的獨特的思想和想法。
同時做" 雜活"是工作的必需，有些東西不能選擇，有些東西卻可以選擇。份內的工作當然要認真完成，但勇敢的"主動請纓"卻能為你贏得更多的機會。只要勤問、勤學、勤做，就會有意想不到的收穫。
我在實習中逐漸變得"勇敢"。雖然開始也會有顧忌，怕"主動出擊"會招惹 "不知天高地厚"的蔑視。但事實告訴我，應該對自己有信心，應該有勇氣去嘗試。即便在嘗試中失敗，也能讓自己成長，沒有鍛鍊的機會，談何積累和成長?而這一切，只能靠自己去爭取。等待，只能讓你在沉默中消亡;只有主動，才能為自己創造良機。
在我看來，不只實習的工作是這樣，其它的行業也應該是這樣。只有這樣，你才能在工作中突出自己，顯現自己的價值。
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